1. Predstavljanje proizvoda
Naziv proizvoda: probiotički prah oralne arome
Specifikacije proizvoda: 2g*30 kom/kutija
Indikacije: Sastav soja koji daje ovaj proizvod može inhibirati rast ključnih patogenih bakterija koje uzrokuju loš zadah i može učinkovito ublažiti simptome lošeg zadaha.
Upute za upotrebu: 3 puta dnevno po 1 tabletu; preporučuje se uzimanje suhog praha oralno neposredno nakon jela. Osobe s kroničnim lošim zadahom trebaju ga uzimati dugo dok im dah ne postane svjež.
Način čuvanja: Čuvati na hladnom mjestu, najbolje u hladnjaku na 4 stupnja.
Broj živih tvari: mješavina probiotika (50 milijardi CFU/g), Bacillus coagulans PB-BC 02 (20 milijardi CFU/g) i Lactobacillus salivarius HH-LS 17 (30 milijardi CFU/g).
Ostali sastojci: 200 mg sorbitola, 200 mg limunske kiseline, 200 mg peperminta u prahu, 200 mg vitamina C, 100 mg fruktooligosaharida, 200 mg galaktooligosaharida, 100 mg sukraloze, 100 mg arome hrane.
2. Patogeneza
Oralna flora je ključna komponenta barijere oralne sluznice i imunološkog odgovora, koji se može oduprijeti invaziji patogena i spriječiti i liječiti oralne bolesti. Oralna mikroekološka neravnoteža može uništiti barijeru oralne sluznice i stvoriti uvjete za naseljavanje bakterija koje proizvode neugodne mirise, uzrokujući tako oralne bolesti kao što je halitoza. Oralna halitoza (IOH) čini 80% do 90% halitoze i uglavnom je uzrokovana proizvodnjom hlapljivih sumpornih spojeva od strane oralnih mikroorganizama. Fusobacterium nucleatum može razgraditi supstrate koji sadrže sumpor u usnoj šupljini u hlapljive spojeve sumpora. Hlapljivi sumporni spojevi (VSC) i njihovi metaboliti također mogu proizvesti tvari kao što su skatol, kadaverin, indol i putrescin, koji mogu uzrokovati neprijatan miris iz usta.
Trenutačno konvencionalni tretmani lošeg zadaha uglavnom uključuju mehaničko uklanjanje (pranje zuba, struganje jezika, itd.), kemijsku terapiju (vodica za ispiranje usta s klorheksidinom, žvakaća guma itd.) i korištenje tradicionalne kineske medicine i prirodnih proizvoda (polifenoli čaja). , vitamin C, katehini itd.). te primjena probiotika itd. Tradicionalne metode liječenja imaju kratkoročne učinke, a dugotrajna primjena može uzrokovati neravnotežu oralne flore. Probiotici mogu regulirati oralnu floru iz korijena i inhibirati rast bakterija koje proizvode neugodne mirise. Stoga je uporaba probiotika za liječenje halitoze postupno postala žarište istraživanja.
3. Mehanizam djelovanja probiotika na poboljšanje lošeg zadaha
Poput bolesti čiji su uzroci mikrobi, kao što su zubni karijes i parodontoza, loš zadah može se liječiti mikrobima ciljanjem na bakterije koje su s njim povezane. Probiotici mogu inhibirati rast oralnih patogenih bakterija, regulirati oralnu floru i održavati zdravlje oralne mikroekologije. Glavni mehanizmi po kojima probiotici djeluju uključuju sljedeće aspekte: (1) Natječu se za mjesta vezanja, smanjuju kolonizaciju patogenih bakterija i koagregiraju s patogenim bakterijama. ; (2) Natječu se za hranjive tvari i faktore rasta i proizvode antibakterijske tvari; (3) Pojačati imunološki odgovor domaćina i inhibirati proizvodnju proupalnih citokina izazvanih patogenima.
4. Hehe Biotechovi probiotici za ublažavanje lošeg zadaha
Broj soja Bacillus coagulans je PB-BC02, a naziv je Bacillus coagulans. Pohranjen je u Kineskom centru za prikupljanje tipskih kultura na Sveučilištu Wuhan u Wuhanu, Kina. Datum polaganja je 12. prosinca 2018. Broj polaganja je CCTCC NO: M2018889.
5. Procjena učinka poboljšanja neugodnog zadaha
U ovoj studiji, 5 probiotičkih sojeva inicijalno je pretraženo procjenom sposobnosti probiotika da inhibiraju proizvodnju H2S pomoću Fusobacterium nucleatum, a dalje je procijenjena sposobnost 5 probiotičkih sojeva da inhibiraju proizvodnju hlapivih sulfidnih spojeva (VSC) i biofilma pomoću Fusobacterium nukleatum. Bacillus coagulans PB-BC 02 i Lactobacillus salivarius HH-LS 17 dva su soja probiotika s dobrim učinkom in vitro. Na kraju, uspoređivane su stope inhibicije probiotika jednog soja i složenih probiotika na rast Fusobacterium nucleatum. Rezultati su pokazali da je složeni Inhibicijski učinak probiotika na rast Fusobacterium nucleatum bolji od onog pojedinačnih bakterija, što ukazuje da kombinacija Bacillus coagulans PB-BC 02 i Lactobacillus salivarius HH-LS 17 ima učinak na poboljšanje lošeg zadaha. . Metode ispitivanja i rezultati su sljedeći:
5.1 Sposobnost probiotika da inhibiraju proizvodnju H2S pomoću Fusobacterium nucleatum
Princip testa: Reakcija H2S i FeSO4 za proizvodnju crnog željeznog sulfida FeS taloga koristi se za procjenu sposobnosti različitih probiotika da inhibiraju proizvodnju H2S pomoću Fusobacterium nucleatum.
Specifični postupak: Napravite otopinu željeznog sulfata i natrijevog tiosulfata, filtrirajte je kroz {{0}}.22 μm sterilnu filtarsku membranu i dodajte u BHI medij kulture kako biste dobili konačnu koncentraciju željeznog sulfata i natrijev tiosulfat 0.2‰ i tiosulfat 0,3‰, Zatim je dodano 2% 109CFU/mL bakterijske suspenzije Fusobacterium nucleatum, a zatim 5% otopine probiotičkih bakterija i uzgajano anaerobno na 37 stupnjeva 36 h.
Rezultati testa: Prikaz na temelju količine proizvedene oborine. "-" znači da nema taloženja, što ukazuje da probiotici imaju snažnu inhibicionu sposobnost protiv Fusobacterium nucleatum. "+" ima malo oborina, "++" ima puno oborina, a " +++" ima puno sedimenta. Rezultati su prikazani u tablici 1. Među 31 probiotičkim sojevima, 11 sojeva imalo je malo taloženja, 8 sojeva imalo je puno taloženja, 7 sojeva imalo je veliku količinu taloženja, a 5 sojeva (Lactobacillus acidophilus HH-LA26, Lactobacillus paracasei HH-LP58, Lactobacillus salivarius HH-LS17, Lactobacillus bifidum HH-BL18 i Bacillus coagulans PB-BC 02) nisu pokazali precipitaciju, što ukazuje na njihov potencijal da poboljšaju halitozu.
Tablica 1 Sposobnost 31 probiotičkog soja da inhibira proizvodnju H2S pomoću Fusobacterium nucleatum
|
naprezanje |
soj broj |
Količina padalina |
naprezanje |
soj broj |
Količina padalina |
|
Lactobacillus plantarum |
HH-LP56 |
+ |
Pediokoki acidilactici |
HH-PA29 |
++ |
|
Lactobacillus plantarum |
HH-LP78 |
+ |
Pediokoki pentosaceus |
HH-PP57 |
+++ |
|
Lactobacillus reuteri |
PB-LR09 |
+ |
Lactococcus lactis subsp. lactis |
HH-LLL39 |
+++ |
|
Laktobacil acidofil |
HH-LA26 |
- |
Lactococcus lactis subsp. cremoris |
HH-LLC36 |
+++ |
|
Lactobacillus rhamnosus |
PB-LR76 |
+ |
Lactococcus lactis subsp. diacetil |
HH-LLD37 |
+++ |
|
Lactobacillus casei |
PB-LC39 |
+ |
Bifidobacterium lactis |
HH-BA68 |
++ |
|
Lactobacillus paracasei |
HH-LP58 |
- |
Bifidobacterium breve |
HH-BR26 |
+ |
|
Lactobacillus salivarius |
HH-LS17 |
- |
Bifidobacterium longum |
HH-BL18 |
- |
|
Lactobacillus bulgaricus |
HH-LB57 |
++ |
Bifidobacterium bifidum |
HH-BB27 |
++ |
|
Lactobacillus helveticus |
HH-LPH17 |
+ |
Bifidobacterium infantis |
HH-BI27 |
++ |
|
Lactobacillus johnsonii |
LBJ 456 |
+ |
Bifidobacterium adolescentis |
HH-BA07 |
+++ |
|
Lactobacillus gasseri |
HH-LG07 |
+ |
Lactobacillus equi Kumulus subsp. |
HH-LK08 |
+++ |
|
Lactobacillus fermentum |
HH-LF392 |
+ |
Bacili koagulani |
PB-BC02 |
- |
|
Lactobacillus crispatus |
HH-LC323 |
++ |
Acetobacter tropicalis |
HH-AT01 |
+++ |
|
Lactobacillus sakei |
LSS858 |
++ |
Lactobacillus plantarum |
N-1 |
+ |
|
Streptokok termofil |
HH-ST08 |
++ |
5.2 Sposobnost probiotika da inhibiraju proizvodnju hlapivih sumpornih spojeva (VSC) pomoću Fusobacterium nucleatum
Testna metoda: Pet sojeva probiotika inicijalno je pretraženo na temelju njihove sposobnosti da inhibiraju proizvodnju H2S pomoću Fusobacterium nucleatum, a VSC koje proizvodi Fusobacterium nucleatum dalje su kvantificirani pomoću instrumenta Halimeter. Ukupno 2 mL 107 CFU/mL bakterijske suspenzije Fusobacterium nucleatum i 15% (v/v) otopine probiotičkih bakterija dodano je u Hungate epruvetu. Nakon zajedničkog uzgoja tijekom 9 sati, izmjerena je sposobnost probiotika da inhibiraju proizvodnju Fusobacterium nucleatum. sposobnosti VSC-a.
Rezultati ispitivanja: VSC su glavni krivci lošeg zadaha. Oni ne odražavaju samo stupanj lošeg zadaha, već i oštećuju tkivo desni, što je vrlo važan pokazatelj. Mjerenjem stope inhibicije pet sojeva dobivenih preliminarnim probirom na VSC koje proizvodi Fusobacterium nucleatum, sojevi su dodatno pretraženi. Rezultati su prikazani u tablici 2. Među njima, inhibicijska sposobnost 3 soja bila je veća od 80%, a inhibicijska stopa 2 soja bila je veća od 80%. Ispod 70%. Stoga su tri probiotička soja uključujući Lactobacillus salivarius HH-LS17, Lactobacillus bifidus longum HH-BL18 i Bacillus coagulans PB-BC02 odabrana za proučavanje njihovih učinaka na stvaranje biofilma Fusobacterium nucleatum.
Tablica 2. Učinak probiotika na proizvodnju VSC-a pomoću Fusobacterium nucleatum
|
naprezanje |
soj broj |
Stopa inhibicije |
|
Laktobacil acidofil |
HH-LA26 |
66% |
|
Lactobacillus paracasei |
HH-LP58 |
63% |
|
Lactobacillus salivarius |
HH-LS17 |
86% |
|
Lactobacillus bifidum longum |
HH-BL18 |
83% |
|
Bacili koagulani |
PB-BC02 |
90% |
5.3 Sposobnost probiotika da inhibiraju stvaranje biofilma bakterije Fusobacterium nucleatum
Metoda ispitivanja: Podesite bakterijsku koncentraciju Fusobacterium nucleatum na 107 CFU/mL i ostavite stajati 9 sati. Zatim ga dodajte u 96-ploču s jažicama. U svaku jažicu dodajte 180 μL suspenzije bakterija Fusobacterium aggregates i 20 μL otopine probiotičkih bakterija. 37 Kultivacija na stupnju 48 h. U negativnoj kontrolnoj skupini dodan je isti volumen MRS medija umjesto probiotičke tekućine, au slijepoj probi dodan je isti volumen BHI umjesto probiotičke tekućine. Nakon inkubacije, isperite dva puta s PBS puferom, zatim fiksirajte s 99% metanolom 15 minuta, odbacite supernatant i osušite na sobnoj temperaturi. Nakon što je sušenje završeno, dodajte 100 μL 0,1% otopine kristal violet u svaku jažicu, obojite 5 minuta, isperite dva puta sterilnom vodom nakon bojenja, a zatim stavite na sobnu temperaturu dok se potpuno ne osuši. Na kraju dodajte 200 μL 33% otopine octene kiseline za otapanje. Nakon miješanja pipetom, otpipetirajte 175 μL iz svake jažice i dodajte u novu 96-ploču s jažicama te očitajte vrijednost apsorbancije pri 570 nm čitačem mikropločica. Metoda izračuna smanjenja posredovanog biofilmom je stopa inhibicije (%)=(biofilm negativne kontrole - količina interventnog biofilma supernatanta) / biofilm negativne kontrole.
Rezultati ispitivanja: Parodontalni džepovi i ovojnica na jeziku čimbenici su rizika za loš zadah jer pružaju idealno okruženje za rast bakterija koje proizvode VSC i druge molekule mirisa. Mikroorganizmi najčešće postoje u obliku biofilmova u parodontnim džepovima i ovojnici jezika. Fusobacterium nucleatum služi kao bakterija posredni most u stvaranju zubnog plaka. Stvaranje njegovog biofilma ključno je za nastanak lošeg zadaha. Stoga je inhibicija njegovog biofilma važan korak u ublažavanju lošeg zadaha. Mogućnosti su pružene. Metoda bojenja kristalno ljubičastom korištena je za određivanje sposobnosti Lactobacillusa da inhibira stvaranje biofilma pomoću Fusobacterium nucleatum. Rezultati su prikazani u tablici 3. Kada je dodana 5% otopina probiotičkih bakterija, Bacillus coagulans PB-BC 02 i Lactobacillus salivarius HH-LS 17 imaju najbolji učinak inhibicije, veći od 35%. Na temelju rezultata inhibicije proizvodnje VSC-a i biofilmova pomoću Fusobacterium nucleatum, Bacillus coagulans PB-BC 02 i Lactobacillus salivarius HH-LS 17 imaju bolje in vitro učinke. Zatim se procjenjuju njihovi učinci na rast Fusobacterium nucleatum.
Tablica 3. Inhibicijski učinci probiotika na biofilm Fusobacterium nucleatum
|
naprezanje |
soj broj |
Stopa inhibicije |
|
Laktobacil acidofil |
HH-LA26 |
27.34% |
|
Lactobacillus paracasei |
HH-LP58 |
25.72% |
|
Lactobacillus salivarius |
HH-LS17 |
39.77% |
|
Lactobacillus bifidum longum |
HH-BL18 |
33.86% |
|
Bacili koagulani |
PB-BC02 |
38.65% |
5.4 Učinak probiotika na rast Fusobacterium nucleatum
Metoda ispitivanja: Dodajte 190 μL 107 CFU/mL bakterijske suspenzije Fusobacterium nucleatum u svaku jažicu 96-pločice s jažicama, zatim dodajte 10 μL otopine probiotičkih bakterija, kulturirajte anaerobno na 37 stupnjeva i pratite na 600 nm svaka 3 sati. Izmjerite vrijednost apsorbancije i nacrtajte krivulju rasta.
Rezultati ispitivanja: Mnoge oralne bolesti uzrokovane su neravnotežom oralne flore. Određena antibakterijska sposobnost pomaže probioticima u regulaciji oralne flore. Rezultati su prikazani na slici 1. Inhibicijski učinak probiotika na Fusobacterium nucleatum je redom složeni probiotici > Lactobacillus salivarius HH-LS 17 > Bacillus coagulans PB-BC 02 > MRS srednje kontrolna skupina, što ukazuje da su oba soja probiotika Može inhibirati rast Fusobacterium nucleatum, a spoj dvaju sojeva ima bolji inhibitorni učinak na Fusobacterium nucleatum.

Slika 1. Učinak probiotika na rast Fusobacterium nucleatum
Ukratko, Bacillus coagulans PB-BC 02 i Lactobacillus salivarius HH-LS 17 mogu inhibirati proizvodnju H2S, VSC i biofilma pomoću Fusobacterium nucleatum, a sposobnost inhibicije rasta Fusobacterium nucleatum nakon spajanja jača je od sposobnosti pojedinačnih sojeva, što ukazuje da kombinacija Bacillus coagulans PB-BC 02 i Lactobacillus salivarius HH-LS 17 može poboljšati loš zadah.
reference:
[1] Karbalaei M, Keikha M, Kobyliak NM, Khatib Zadeh Z, Yousefi B, Eslami M. Ublažavanje halitoze upotrebom probiotika i njihovih zaštitnih mehanizama u usnoj šupljini. Novi mikrobi New Infect. 23. travnja 2021.; 42:100887. doi: 10.1016/j.nmni.2021.100887. PMID: 34123388; PMCID: PMC8173312.
[2] Penala S, Kalakonda B, Pathakota KR, Jayakumar A, Koppolu P, Lakshmi BV, Pandey R, Mishra A. Učinkovitost lokalne uporabe probiotika kao dodatka uklanjanju kamenca i planiranju korijena kod kroničnog parodontitisa i halitoze: randomizirano kontrolirano suđenje. J Res Pharm Pract. 2016. travanj-lipanj;5(2):86-93. doi: 10.4103/2279-042X.179568. PMID: 27162801; PMCID: PMC4843589.
[3] Jiang Zhentao. Probir laktobacila koji inhibiraju Fusobacterium nucleatum i procjena njihove učinkovitosti u poboljšanju halitoze [D]. Sveučilište Jiangnan, 2022. DOI: 10.27169/d.cnki.gwqgu.2022.000533.
[4] Huang Zhiqiang, Cheng Yongbo. Konstrukcija i procjena modela halitoze kod štakora uzrokovane neravnotežom oralne flore [J]. Istraživanje oralne medicine, 2023., 39(08): 745-750. DOI: 10.13701/j. cnki.kqyxyj.2023.08.015.
[5] Yang Wenjie, Ye Wei. In vitro studija o antibakterijskom učinku dviju vrsta probiotika na bakterije koje uzrokuju halitozu [J]. Oralna medicina, 2015., 35(03):179-182.DOI:10.13591/j.cnki.kqyx .2015.03.005.
Popularni tagovi: probiotici za ublažavanje lošeg zadaha, proizvođači, tvornica, po narudžbi, veleprodaja, rasuto












